陰道炎六聯(lián)檢測試劑盒（酶化學(xué)法）產(chǎn)品說明:

?【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：陰道炎六聯(lián)檢測試劑盒（酶化學(xué)法）

英文名稱：Vaginitis Six-indicator Text Kit (Enzymatic assay)

【包裝規(guī)格】

??20人份/盒，30人份/盒，50人份/盒，100人份/盒。

【預(yù)期用途】?

本試劑盒用于體外定性檢測女性陰道分泌物中過氧化氫、唾液酸苷酶、白細(xì)胞酯酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH值。

輔助判斷女性陰道微生態(tài)環(huán)境，輔助提示細(xì)菌性陰道病、念珠菌性陰道炎和滴蟲性陰道炎的可能。

【檢驗(yàn)原理】

陰道分泌物常規(guī)檢測是診斷陰道疾病的重要手段，因此，對(duì)陰道分泌物準(zhǔn)確、及時(shí)的實(shí)驗(yàn)室檢查具有十分重要的臨床意義。

A. 過氧化氫濃度檢測：研究發(fā)現(xiàn)，乳酸桿菌是女性生殖道的優(yōu)勢菌，過氧化氫為乳酸桿菌的代謝產(chǎn)物，具有殺菌抑菌作用，通過檢測過氧化氫可以檢測陰道分泌物中乳酸桿菌的存在與否。反應(yīng)卡上的過氧化氫墊上4-氨基安替比林在過氧化氫的作用下與顯色劑3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉發(fā)生反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。反應(yīng)結(jié)果顯紅色或紫紅色，顏色深度與過氧化氫濃度成正比，當(dāng)標(biāo)本中過氧化氫濃度低于一定量時(shí)，反應(yīng)墊不變色。

B. 唾液酸苷酶（SNA）活性檢測：唾液酸苷酶是細(xì)菌性陰道?。˙V）致病菌所產(chǎn)生的特異性酶之一，已證實(shí)其在陰道分泌物中的活性與BV發(fā)病的嚴(yán)重程度相關(guān)，反應(yīng)卡上的唾液酸苷酶墊上底物5-溴-4氯-3吲哚基乙酰神經(jīng)氨酸鈉鹽經(jīng)陰道內(nèi)唾液酸苷酶水解后，其產(chǎn)物之一與顯色指示劑起反應(yīng)后顯示紅色或紅紫色。

C. 白細(xì)胞酯酶（LE）活性檢測：當(dāng)人體發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，多核白細(xì)胞的趨化性在炎性病灶聚集而大量釋放白細(xì)胞酯酶。反應(yīng)卡上的白細(xì)胞酯酶墊上底物5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯經(jīng)陰道內(nèi)白細(xì)胞酯酶水解，其產(chǎn)物之一乙酸酯在空氣中氧氧化作用下發(fā)生自我聚合后呈藍(lán)綠色或藍(lán)色。

D．脯氨酸氨基肽酶（PIP）檢測：脯氨酸氨基肽酶與加德納氏菌和動(dòng)彎桿菌相關(guān)，故該項(xiàng)酶檢測可以大大提高BV的檢出率。反應(yīng)卡上的脯氨酸氨基肽酶墊上底物脯胺酸對(duì)硝基苯胺經(jīng)陰道內(nèi)脯氨酸氨基肽酶水解，其產(chǎn)物之一對(duì)硝基苯胺在反應(yīng)墊上呈黃色。

E．乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）檢測：滴蟲與念球菌可產(chǎn)生乙酰氨基葡萄糖苷酶，因此可以通過檢測乙酰氨基葡萄糖苷酶指示滴蟲和念球菌感染可能性。反應(yīng)卡上的乙酰氨基葡萄糖苷酶墊上底物對(duì)硝基苯乙酰氨基葡萄糖苷經(jīng)陰道內(nèi)的乙酰氨基葡萄糖苷酶水解，其產(chǎn)物之一對(duì)硝基苯酚在終止液作用下顯黃色。

F．pH值檢測：陰道中乳酸桿菌能分解陰道上皮細(xì)胞所含的糖原成乳酸以維持陰道pH在3.8-4.4之間，可抑制其他細(xì)菌的生長繁殖。在陰道炎癥時(shí)，病原菌消耗了糖原，阻礙了陰道桿菌的酵解作用，使pH值升高，堿性增大，病原菌大量繁殖，陰道潔凈度變差，所以陰道分泌物中的pH值檢查就顯得至關(guān)重要，研究發(fā)現(xiàn)，念球菌白帶pH一般在4.0-4.6，滴蟲白帶pH一般在4.8以上，通過結(jié)合pH值可將二者區(qū)分開。反應(yīng)卡上的pH值墊上指示劑底物在pH從4.1到5.1時(shí)，顏色顯示為黃色——草綠色——綠色——青綠色——青色——藍(lán)色。

【主要組成成分】

1.試劑盒中包含的試劑組分

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2．主要組分及含量說明

2.1檢測卡

由反應(yīng)墊和五聯(lián)卡組成（主要成分為PV材料），用含有干燥劑的鋁箔袋密封；每一人份含一張檢測卡。檢測卡上的主要化學(xué)成份4-氨基安替吡啉、2-羥基-3,5-二氯苯磺酸鈉鹽、5-溴-4-氯-3吲哚乙酯、5-溴-4-氯-3吲哚乙酰神經(jīng)氨酸鹽、脯氨酸對(duì)硝基苯胺、溴甲酚綠、對(duì)硝基苯胺乙酰氨基葡萄糖苷。

2.2 SNA顯色液

主要成分為固紫B，含量為0.45～0.55%

2.3 H2O2顯色液

主要成分為辣根過氧化物酶，含量為0.01～0.015%

2.3 NAG終止液

主要成分為四硼酸鈉，含量為0.045～0.05%

2.4稀釋液

主要成分為2-嗎啉乙磺酸，1.9～2.5% 。

3.產(chǎn)品不包含，需自備的試劑盒儀器

棉拭子；

一次性手套、吸管、試管；

定時(shí)器；

溫箱或水浴箱；

恒溫干浴器

【儲(chǔ)存條件及有效期】

保存于2～8℃，有效期為365天。開瓶后保存于2～8℃，有效期為15天。

【樣本要求】

1.?? 非經(jīng)期取樣，且取樣前24小時(shí)應(yīng)禁止性交、盆浴、陰道灌洗及局部上藥等；

2.?? 用無菌棉拭子在陰道后穹窿處或陰道深處旋轉(zhuǎn)2-10周，停留10-20秒，盡可能多地采集患者陰道分泌物，以清晰見到棉簽上有分泌物附著為準(zhǔn)；

3.?? 取樣后的標(biāo)本應(yīng)及時(shí)測定。

【檢驗(yàn)方法】

1.?? 取出試劑盒平衡至室溫；

2.?? 撕掉包裝，水平放置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上；

3.?? 將已經(jīng)取樣的棉拭子先在pH的反應(yīng)孔內(nèi)點(diǎn)印一下，即刻對(duì)照比色卡記錄pH結(jié)果；

4.?? 取一干凈加樣試管，滴加樣品稀釋液10-12(約400μl)滴，將取樣的棉拭子置于該試管中，反復(fù)擠壓棉拭子，使陰道分泌物充分釋出；

5.?? 用吸管吸取樣本液，在反應(yīng)卡的另5個(gè)孔中各加1滴樣本液（約35μl），然后在“過氧化氫孔”滴加1滴“H2O2顯色液”，在“唾液酸苷酶孔”滴加1滴“SNA顯色液”。

6.?? 將加樣后的檢測卡放于恒溫箱（37℃）或恒溫干浴器（45℃）溫浴15分鐘，之后在“乙酰氨基葡萄糖苷酶孔”滴加1滴NAG終止液，30秒后2分鐘內(nèi)判讀其余5孔結(jié)果。

【陽性判斷值或者參考區(qū)間】

各反應(yīng)孔均陰性，pH≤4.4

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1.??? 過氧化氫孔(H2O2)：顯不同程度紅色為陰性，不變色為陽性；

2.??? 唾液酸苷酶孔(SNA)：不顯色為陰性；顯不同程度的紅或紫色為陽性；

3.??? 白細(xì)胞酯酶孔(LE)：不顯色為陰性；顯不同程度的藍(lán)色為陽性；

4.??? 脯氨酸氨基肽酶孔(PIP)：不顯色為陰性；顯不同程度的淡黃色或者黃色表示陽性；

5.??? 乙酰氨基葡萄糖苷酶孔(NAG)：不顯色為陰性；顯不同程度的淡黃色或者黃色表示陽性；

6.????????? pH孔：顏色從黃色—草綠色—綠色—青綠色—青色—藍(lán)色，分別表示pH從4.1—4.4—4.6—4.7—4.8—5.1。

7. ??NAG陽性的標(biāo)本必須經(jīng)其他方法確認(rèn)，因?yàn)榭紤]混合感染，而且滴蟲和念珠菌感染兩者治療方案不同。

? ??????????????????下表“臨床參考判定”提示疾病發(fā)生的可能性，判定結(jié)果僅供參考

?

H2O2	LE	SNA	PIP	NAG	pH	臨床參考判定
－	－	－	－	－	≤4.4	正常
＋	－	－	－	－	≥4.6	陰道生態(tài)平衡破壞
－	＋	－	－	－	≥4.6	陰道存在炎癥
－	－	＋	－	－	≥4.6	細(xì)菌性陰道病
－	－	－	＋	－	≥4.6	細(xì)菌性陰道病
－	－	－	－	＋	≥4.8	滴蟲性陰道炎
－	－	－	－	＋	≤4.7	念珠菌性陰道炎

注：多孔陽性時(shí)按照單孔陽性各自判定。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1.??? 本試劑盒為定性檢測產(chǎn)品；

2.??? 對(duì)顯色結(jié)果的判讀，存在一定的人為主觀性；

3.??? 由于女性陰道菌群比較復(fù)雜，干擾因素較多，檢測結(jié)果只提示可能性，臨床診斷應(yīng)結(jié)合其它經(jīng)確認(rèn)的方法和臨床癥狀進(jìn)行綜合判斷，本試劑盒檢測項(xiàng)只作為細(xì)菌性陰道病的初篩和輔助診斷用。

4.??? 脯氨酸氨基肽酶可由多種厭氧細(xì)菌和真菌產(chǎn)生，陽性時(shí)不能排除有其他菌感染的可能。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1.????????? 符合率：試劑盒對(duì)陽性參考品試驗(yàn)，結(jié)果符合率100%，試劑盒對(duì)陰性參考品試驗(yàn)，結(jié)果符合率100%；

2.????????? 重復(fù)性：同批次試劑盒對(duì)同一份陽性參考品進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，結(jié)果均應(yīng)為陽性；

3.????????? 批間差：不同批次試劑盒對(duì)同一份陽性參考品進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，結(jié)果均應(yīng)為陽性。

【注意事項(xiàng)】

1.??? 本品僅用于體外診斷，操作前請認(rèn)真閱讀本說明書；

2.??? 請認(rèn)準(zhǔn)反應(yīng)卡上六個(gè)測試孔上的標(biāo)識(shí)，“H2O2顯色液”只用于“過氧化氫孔”，“SNA顯色液”只用于“唾液酸苷酶孔”，“NAG終止液”只用于“乙酰氨基葡萄糖苷酶孔”。

3.??? 先兆流產(chǎn)、月經(jīng)期婦女不適合使用本產(chǎn)品；

4.??? 本試劑的檢測卡僅供一次性使用，使用后按《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》規(guī)定棄去。

5.??? 為了避免樣本中任何潛在的生物危險(xiǎn)，檢測樣本應(yīng)視為具有傳染性物質(zhì)，避免接觸皮膚和粘膜；樣本操作和處理均需符合相關(guān)法規(guī)要求：衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》和《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》。

【標(biāo)識(shí)的解釋】

試劑盒標(biāo)簽所用圖形符號(hào)	說明
	體外診斷試劑
	使用前閱讀說明書
	儲(chǔ)存溫度

【參考文獻(xiàn)】

1.??????? Kyoko Niimi,Maxwell G.. Shepherd，and Richard D.Cannon.Distinguishing Candida Species by b-N-Acetylhexosaminidase Activity[J].Journal of Clinical Microbiology,2001,19(6)：2089-2097.

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6.?? 于慶珍，楊文東等.陰道分泌物PIP活性檢測快速診斷細(xì)菌性陰道病及治療效果觀察[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2007.14（9）：1133-1134.

【基本信息】